[생명과학실험] Tris-HCl Buffer 만들기 - 단백질 분리정제 및 기능분석
[생명과학실험] Tris-HCl Buffer 만들기 - 단백질 분리정제 및 기능분석
Tris-HCl Buffer 만들기 - 단백질 분리정제 및 기능분석
주제 : 단백질 분리정제 및 기능분석
실험일시 : 2008년 3월 11일 2:00p.m.~ 4:30p.m.
목적 : Column chromatography의 준비로서의 buffer만들기
실험목표 : 1M의 Tris-HCl (pH7.4), NaCl, MgSO4 Stock solution을 제조한 후 다양한 NaCl 농도의 elution buffer를 만든다.
실험도구 : pH 미터기, Tris 가루, HCl, 증류수, 마그네틱 바, stirier, spatula, pipette (1ml), 메스실린더 (50ml이상), 비커, 전자저울, 비닐장갑, 기름종이, 50ml튜브
Introoduction
Buffer solution
Buffer solutions는 적은 양의 산이나 염기를 첨가하거나 희석시킬 경우, 용액의 H+와 OH- 의 농도 변화를 줄이기 위해 사용하는 용액이다. Buffer solutions는 약산과 그것의 짝염기로 이루어진 것이 일반적이며, 약염기와 그것의 짝산으로 이루어진 경우는 전자보다 적다. 용액의 pH변화에 저항하는 buffer solutions의 기능은 앞서 말한 약산과 그 짝염기의 평형에 의한 결과로, Le Chatelier의 공통이온효과에 의해 설명될 수 있다.
HA(aq) + H2O(l) → H3O+(aq) + A−(aq)
만약 위의 용액에 염기를 첨가하면, 염기는 곧 산-염기 중화반응을 통해 H3O+를 제거하고, 평형반응에 의해 위의 반응은 정반응이 진행되어 원래의 pH를 유지하게 된다. 마찬가지로, 위 용액에 강산을 첨가하면, 짝염기 A−와 protonated 되어 역반응이 진행되므로 원래의 pH가 유지될 수 있다. 이러한 현상은 강산이나 강염기의 용액에 산 또는 염기를 떨어뜨렸을 때와 큰 차이를 보이는데, 이는 강산에 강염기를 이용해 titration 할 때보다 약산과 약염기를 titration할 때 pKa값 근처에서의 pH 변화가 작은 현상과 비슷하다.
....
주제 : 단백질 분리정제 및 기능분석
실험일시 : 2008년 3월 11일 2:00p.m.~ 4:30p.m.
목적 : Column chromatography의 준비로서의 buffer만들기
실험목표 : 1M의 Tris-HCl (pH7.4), NaCl, MgSO4 Stock solution을 제조한 후 다양한 NaCl 농도의 elution buffer를 만든다.
실험도구 : pH 미터기, Tris 가루, HCl, 증류수, 마그네틱 바, stirier, spatula, pipette (1ml), 메스실린더 (50ml이상), 비커, 전자저울, 비닐장갑, 기름종이, 50ml튜브
Introoduction
Buffer solution
Buffer solutions는 적은 양의 산이나 염기를 첨가하거나 희석시킬 경우, 용액의 H+와 OH- 의 농도 변화를 줄이기 위해 사용하는 용액이다. Buffer solutions는 약산과 그것의 짝염기로 이루어진 것이 일반적이며, 약염기와 그것의 짝산으로 이루어진 경우는 전자보다 적다. 용액의 pH변화에 저항하는 buffer solutions의 기능은 앞서 말한 약산과 그 짝염기의 평형에 의한 결과로, Le Chatelier의 공통이온효과에 의해 설명될 수 있다.
HA(aq) + H2O(l) → H3O+(aq) + A−(aq)
만약 위의 용액에 염기를 첨가하면, 염기는 곧 산-염기 중화반응을 통해 H3O+를 제거하고, 평형반응에 의해 위의 반응은 정반응이 진행되어 원래의 pH를 유지하게 된다. 마찬가지로, 위 용액에 강산을 첨가하면, 짝염기 A−와 protonated 되어 역반응이 진행되므로 원래의 pH가 유지될 수 있다. 이러한 현상은 강산이나 강염기의 용액에 산 또는 염기를 떨어뜨렸을 때와 큰 차이를 보이는데, 이는 강산에 강염기를 이용해 titration 할 때보다 약산과 약염기를 titration할 때 pKa값 근처에서의 pH 변화가 작은 현상과 비슷하다.
....
-
[화학실험] 단백질 분리정제 및 기능분석 - column chromatography의 준비로서의 buffer 만들기
Report 1. 실험날짜 2. 주제 단백질 분리정제 및 기능분석 - column chromatography의 준비로서의 buffer 만들기 3. 목표 1M의 TRIS-HCl(pH 7.4), NaCl, MgSO Stock solution을 제조한 후 다양한 NaCl농도의 clu.. -
단백질 분리 및 정제
단백질 분리 및 정제 [[첫째 날]] (1) Sample Preparation Principle: • Extraction Buffer(=lysis buffer) : Tris, TritonX-100, NP-40, SDS 등 여러 가지 detergent들이 cell wall과 mitochondria membran.. -
단백질분리정제
▣ 단백질의 분쇄 및 원심분리 (1) Homogenizer : 시료의 충분한 혼합, 교반, 분쇄에 사용되는데 시료속에서 dispersing shaft가 회 전할 때 dispersing shaft의 끝부분의 rotor구멍으로 시료가 강하게 빨려 들어.. -
단백질기술
단백질기술 (분석, 정제) 과 목: 생화학실험 교수님: 한인섭 교수님 학 과: 생명공학과 학 번: 19991050 이 름: 정 설 화 단백질 분리 및 정제 1. 크로마토그라피(chromatography) 크로마토그라피란 다공.. -
생화학 실험 - Western Blot 실험 결과
Western Blot 실험 결과 -실험 제목 : Western blot -실험날짜 : -실험 목적 : 단백질을 크기별로 분리하는 기술로 항원-항체 반응을 이용하여 전체 단백질에서 특정 단백질만을 Detection 할 수 있다. 이번 We.. -
[강추][학업계획서] 이화여자대학교 생명과학전공 편입 학업계획서
또한, 실험실습과 연구 참여를 통해 실험설계, 데이터 분석, 문제 해결 능력을 키우겠습니다. 이를 통해 한국생명과학연구의 국제적 경쟁력 강화에도 기여할 것입니다. 실험실수업과 연구 프로젝트를 통해 실제 생.. -
Tris-Buffer 의 온도와 pH
Tris-Buffer 의 온도와 pH 모든 Buffer 는 몇 가지 경우에 관하여 온도에 대해 sensitve 하다. Tris-Buffer 의 경우에서는 Temperature 에 관해서는 민감하며, 실험을 할 경우 사용하는 온도에 pH 도 관련이 .. -
생물학 실험보고서 - DNA work
[생물학실험보고서] 1. 실험 제목 : DNA work 2. 실험 목적 : 세균의 세포벽을 파괴하고 plasmid DNA를 분리한다. 분리한 plasmid DNA를 형질전환을 시키고 배지에서 키운다. 배지에서 키운후 제한효소를 이용해.. -
단백질 정제
단백질 정제 목 차 1) 단백질정제의 목적 2) 단백질 정제 시 고려사항 3) 단백질의 안정화 4) 단백질의 추출 ① 세포질에 존재하는 가용성 단백질의 추출 ② 세포막에 존재하는 막 단백질의 가용화와 추출 5).. -
[생명과학] 양파표피세포 실험 - 적혈구의 용혈현상과 식물세포의 원형질분리
실험제목 : 적혈구의 용혈현상과 식물세포의원형질분리 실험목적 : 광학현미경을 이용해 혈액의 용혈현상, 수축현상 양파표피의 팽윤현상과 원형질분리 현상을 관찰해본다. 실험재료 : 양파, 혈액, 광학현미경, ..
