Lowry, Kjeldahl 법을 이용한 단백질 정량
Lowry, Kjeldahl 법을 이용한 단백질 정량
Title : Kjeldahl 법을 이용한 단백질 정량
[ Introduction ]
식품중의 단백질은 탄소, 수소, 산소의 각 원소 외에 반드시 일정량의 비율로 질소를 함유하고 있다. 특히 질소는 지방이나 탄수화물 등 식품의 다른 중요 성분에는 포함되어 있지 않으므로, 식품중의 단백질 정량은 전질소량을 정량하고 그 값에 일정의 계수를 곱하여 조단백질의 양을 구한다.
[ Principle ]
질소정량법으로는 여러 가지 방법이 있지만 1883년 Kjeldahl이 제안한 방법이 오늘날 널리 이용되고 있다. 이 방법의 원리는 다음과 같다. 즉 일정량의 시료에 진한 황산과 촉매를 가열하면 식품성분의 분해반응과 동시에 산화, 환원 반응이 발생하여 시료 중의 질소는 모두 암모니아로 되는데 이 암모니아는 반응액의 황산과 결합하여 황산암모늄의 형태로 분해액 중에 남는다. 이 황산암모늄은 식품의 다른 여러 가지 분해물과 같이 존재하기 때문에 황산암모늄을 구성하는 질소의 양을 정량하기가 어려우므로 이 질소만을 따로 분리하기 위하여 과잉의 알칼리를 가하고 가열하면 황산암모늄 중의 질소는 알칼리와 반응하여 암모니아 기체로 변하여 식품 중의 다른 분해물과 분리된다. 암모니아는 휘발성이 강하기 때문에 일정량의 산성 물질에 흡수시켜 질소의 형태를 다시 황산암모늄으로 중화시킨다. 이 황산암모늄은 황산과 암모니아가 화학당량적으로 반응하여 생성된 것이고 단지 황산 용액과 존재하기 때문에 남아 있는 과잉의 황산을 알칼리 용액으로 역적정하면 황산과 반응한 질소의 양을 산출할 수 있다.
1) 분 해
시료에 진한 황산과 분해촉진제를 가해 가열하면 식품성분의 분해가 시작되어 유기물의 탈수탄화와 산화환원반응이 일어나 시료 중의 질소는 암모니아로 되고 분해 플라스크 중에 잔존하는 진한 황산과 다음과 같이 반응하여 황산암모늄의 형태로 분해액 중에 포집된다.
질소화합물 + 진한 (유기물의 탄화)
+ → (수소가 암모니아의 생성을 촉진)
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[ Introduction ]
식품중의 단백질은 탄소, 수소, 산소의 각 원소 외에 반드시 일정량의 비율로 질소를 함유하고 있다. 특히 질소는 지방이나 탄수화물 등 식품의 다른 중요 성분에는 포함되어 있지 않으므로, 식품중의 단백질 정량은 전질소량을 정량하고 그 값에 일정의 계수를 곱하여 조단백질의 양을 구한다.
[ Principle ]
질소정량법으로는 여러 가지 방법이 있지만 1883년 Kjeldahl이 제안한 방법이 오늘날 널리 이용되고 있다. 이 방법의 원리는 다음과 같다. 즉 일정량의 시료에 진한 황산과 촉매를 가열하면 식품성분의 분해반응과 동시에 산화, 환원 반응이 발생하여 시료 중의 질소는 모두 암모니아로 되는데 이 암모니아는 반응액의 황산과 결합하여 황산암모늄의 형태로 분해액 중에 남는다. 이 황산암모늄은 식품의 다른 여러 가지 분해물과 같이 존재하기 때문에 황산암모늄을 구성하는 질소의 양을 정량하기가 어려우므로 이 질소만을 따로 분리하기 위하여 과잉의 알칼리를 가하고 가열하면 황산암모늄 중의 질소는 알칼리와 반응하여 암모니아 기체로 변하여 식품 중의 다른 분해물과 분리된다. 암모니아는 휘발성이 강하기 때문에 일정량의 산성 물질에 흡수시켜 질소의 형태를 다시 황산암모늄으로 중화시킨다. 이 황산암모늄은 황산과 암모니아가 화학당량적으로 반응하여 생성된 것이고 단지 황산 용액과 존재하기 때문에 남아 있는 과잉의 황산을 알칼리 용액으로 역적정하면 황산과 반응한 질소의 양을 산출할 수 있다.
1) 분 해
시료에 진한 황산과 분해촉진제를 가해 가열하면 식품성분의 분해가 시작되어 유기물의 탈수탄화와 산화환원반응이 일어나 시료 중의 질소는 암모니아로 되고 분해 플라스크 중에 잔존하는 진한 황산과 다음과 같이 반응하여 황산암모늄의 형태로 분해액 중에 포집된다.
질소화합물 + 진한 (유기물의 탄화)
+ → (수소가 암모니아의 생성을 촉진)
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단백질의 정량법
단백질의 정량법 1. Kjeldahl법 Kjeldahl법은 단백질(또는 식품, 질소를 포함하는 다른 유기물)의 총 질소량을 정량하는 데 널리 이용되는 방법이다. 단백질을 촉매(예: CuSo₄,SeO₂,HgO)의 존재 하에서 진한 .. -
단백질의 정량
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[생화학실험] 단백질 정량 분석 - BCA법, SDS-PAGE 분석, Western Blot
1. 제목 : 단백질 정량 분석 – BCA법 SDS-PAGE 분석 Western Blot 2. 실험 목적 : BCA Method를 이용하여 우유 중의 단백질 함량을 분석하고 SDS-PAGE와 Coomassie Blue 염색을 통해 단백질의 전기영동 결과를 관.. -
[생화학실험] 단백질 정량 분석 - BCA법 SDS-PAGE 분석 Western Blot
실험 일시: 1. 제목 : 단백질 정량 분석 – BCA법 SDS-PAGE 분석 Western Blot 2. 실험 목적 : BCA Method를 이용하여 우유 중의 단백질 함량을 분석하고 SDS-PAGE와 Coomassie Blue 염색을 통해 단백질의 전기영.. -
실험보고서 - 단백질과 DNA의 정량
1. 실험제목 : 단백질과 DNA의 정량 2. 실험목적 : - 단백질을 구성하는 아미노산의 구조와 특성을 이해하고 아미노산의 특성을 이용한 몇 가지 단백질 정량 방법을 이해한다 - 대표적인 단백질 정량방법인 Bradfo.. -
단백질
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생물학 및 실험
단백질정량이란 시료 내에 포함된 단백질의 양, 또는 농도를 구하는 과정 언제 단백질 정량을 하는가 wild type cell과 mutant cell 사이의 특정 protein양 발현에 차이 여부를 western blot을 이용해서 확인하고.. -
[실험보고서] 단백질정량 bradford 실험 - 예비와 결과 보고서
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실습보고서 - 단백질 정량법
실습보고서 [단백질 정량법] ◎ 목적 Bradford method를 통해 미지 시료의 단백질 농도를 알아보고 그 원리를 안다. ◎ 이론 ● 브래드 퍼드법(Bradford method) UV-Visible Spectrophotometer를 이용, 흡광도를.. -
단백질정량실험
단백질 정량 실험 1.실험목적 단백질에 대해 알아보고 Biure에 의한 정량을 이용해 단백질을 정량하고 흡광도를 이용하여 BSA표준 용액과 미지의 단백질 용액을 비교하여 농도를 알아보는 것이다. 2.실험이론 →..
