실험보고서 - 단백질과 DNA의 정량
실험보고서 - 단백질과 DNA의 정량
1. 실험제목 : 단백질과 DNA의 정량
2. 실험목적 :
- 단백질을 구성하는 아미노산의 구조와 특성을 이해하고 아미노산의 특성을 이용한 몇 가지 단백질 정량 방법을 이해한다
- 대표적인 단백질 정량방법인 Bradford assay와 Lowry method를 이용하여 단백질을 정량 한다
- DNAdml 구조 및 DNA를 구성하는 네 가지 염기의 구조와 특성을 이해하고 DNA의 정량 방법과 순도결정 방법을 실험한다
3. 실험원리
★ Bradford Assay
원 리
- Coomassie Brilliant Blue G-250 (CBBG) 가 arg, trp, tyr, his, phr 에 결합시 흡광도의 변화를 측정한다
- dye는 6개의 phenyl groups 과 2개의 sulfonic acid groups을 통해서 단백질과 결합한다. hydrophobic (Tryptophan, Tyrosine, Histidine and phenylalanine) 과 electrostatic (arginine, Lysine) residues를 통해 주로 약하고, noncovalent한 결합을 한다.
- Coomassie Brilliant Blue G-250 dye 는 세가지 형태로 있다
red ( max = 470 nm), blue ( max = 590 nm) and green ( max = 650 nm).
- CBBG 은amino acid와 결합하여 anionic form을 가지고, 595 nm 최대흡광을 (blue)을 가진다. free dye의 경우cationic form 으로 최대 흡광은 465 nm (red)이다.
- 강한 산성 상태에서는 dye는 doubly-protonated red form으로 가장 안정한 형이고, 단백질에 결합시에 dye는 unprotonated, blue form이 가장 안정한 형이다.
free dye(cationic) bound dye(anionic)
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2. 실험목적 :
- 단백질을 구성하는 아미노산의 구조와 특성을 이해하고 아미노산의 특성을 이용한 몇 가지 단백질 정량 방법을 이해한다
- 대표적인 단백질 정량방법인 Bradford assay와 Lowry method를 이용하여 단백질을 정량 한다
- DNAdml 구조 및 DNA를 구성하는 네 가지 염기의 구조와 특성을 이해하고 DNA의 정량 방법과 순도결정 방법을 실험한다
3. 실험원리
★ Bradford Assay
원 리
- Coomassie Brilliant Blue G-250 (CBBG) 가 arg, trp, tyr, his, phr 에 결합시 흡광도의 변화를 측정한다
- dye는 6개의 phenyl groups 과 2개의 sulfonic acid groups을 통해서 단백질과 결합한다. hydrophobic (Tryptophan, Tyrosine, Histidine and phenylalanine) 과 electrostatic (arginine, Lysine) residues를 통해 주로 약하고, noncovalent한 결합을 한다.
- Coomassie Brilliant Blue G-250 dye 는 세가지 형태로 있다
red ( max = 470 nm), blue ( max = 590 nm) and green ( max = 650 nm).
- CBBG 은amino acid와 결합하여 anionic form을 가지고, 595 nm 최대흡광을 (blue)을 가진다. free dye의 경우cationic form 으로 최대 흡광은 465 nm (red)이다.
- 강한 산성 상태에서는 dye는 doubly-protonated red form으로 가장 안정한 형이고, 단백질에 결합시에 dye는 unprotonated, blue form이 가장 안정한 형이다.
free dye(cationic) bound dye(anionic)
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[실험보고서] 단백질정량 bradford 실험 - 예비와 결과 보고서
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단백질정량실험
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단백질의 정량
단백질의 정량 Ⅰ. 실험 목적 단백질 정량의 원리를 이해하고, 우유 속 단백질을 정량해본다. Ⅱ. 서론 1) 단백질 정량 단백질 정량이란 sample 내에 포함된 단백질의 양, 또는 농도를 구하는 과정으로써, 대부.. -
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PCR 검사 실험 목표 DNA와 PCR에 대하여 이해하고 직접 특정 유전자를 증폭 해 본다. 실험 이론 DNA(deoxyribonucleic acid) : 핵산(nucleic acid)의 일종으로, 세포내에서 생물의 유전정보를 보관하는 물질 .. -
생물공학실험 DNA정량법
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plasmid DNA 추출 보고서
plasmid DNA 추출 1. 서론 분자생물학의 도움으로 생물체 내의 여러 가지 생화학적 반응의 조절과 질병의 치료에 대한 이해가 분자적 수준에서 이루어지고 있다. DNA의 생물체 내에서의 이러한 작용이 밝혀짐에.. -
[생화학실험] 단백질 정량 분석 - BCA법, SDS-PAGE 분석, Western Blot
1. 제목 : 단백질 정량 분석 – BCA법 SDS-PAGE 분석 Western Blot 2. 실험 목적 : BCA Method를 이용하여 우유 중의 단백질 함량을 분석하고 SDS-PAGE와 Coomassie Blue 염색을 통해 단백질의 전기영동 결과를 관.. -
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[화학실험보고서] Copper(Ⅱ) glycinate 의 정량 분석
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