일반생물학 - 대장균의 DNA 추출과 정량에 대한 실험 보고서
일반생물학 - 대장균의 DNA 추출과 정량에 대한 실험 보고서
일반생물학 - 대장균의 DNA 추출과 정량에 대한 실험 보고서
1. Abstract
이번 실험은 우리가 이론상으로만 알고 있던 DNA를 직접 추출해 눈으로 관찰해 봄으로써 DNA에 대한 이해를 높이고 겔로딩 과정을 익혀볼 수 있는 실험이다. 그래서 이번 실험에는 구하기가 쉽고 실험하기 안전한 대장균의 DNA를 직접 추출해보고, 전기영동을 한 뒤 UV lamp를 통해 관찰해 보았다.
먼저, 대장균을 원심 분리시켜서 추출해 낸 뒤 EDTA 용액을 통해 세포벽을 제거하고, 10% SDS 용액을 이용해 세포막을 파괴시킨 다음 NaOH 용액을 사용해 DNA를 용해시킨다. 그러면 모든 세포소기관 및 DNA가 수용액 속에 전부다 녹아들어 용액이 맑아지게 되는데 여기에 NaCl과 95% EtOH를 넣어주어 DNA가 뭉쳐지도록 만들어 DNA를 침전시킨다. 그 후 침전된 DNA를 유리막대로 감아 추출해낸 뒤 DNA에 loading buffer을 첨가하고 겔 전기영동을 시킨다. 그렇게 완료된 겔 전기영동을 UV lamp를 통해 관찰해 보면 DNA와 Plasmid, RNA 등을 관찰해볼 수 있다.
2. Introduction
대장균은 주로 포유류의 장속에 사는 세균으로, 특히 대장에 많이 존재한다 하여 대장균이라 불린다. 대부분의 대장균과 그의 변종은 해롭지 않지만, 일부 대장균들은 사람에게 식중독을 일으키며, 가끔 대규모의 식품 리콜의 원인이 된다. 해롭지 않은 대장균들은 인간의 공생동물이며 비타민 K2등을 생산하여 이로움을 주기도 하며, 창자에서 병의 원인이 되는 박테리아의 번식을 막기도 한다. 대장균은 창자에만 있는 것은 아니나 밖으로 방출되더라도 장관내 이외의 자연계에서는 보통 증식이 되지 않는다. 또한 쉽게 번식하고 유전적으로 단순하고 다루기 쉽고 안전하여 가장 많이 연구된 원핵생물의 표본생물이며, 바이오테크놀로지에서도 중요하게 쓰인다. 따라서 이번 실험에서도 대장균이 실험하기 매우 용이하기 때문에 DNA추출 대상을 대장균으로 정하였다.
....
1. Abstract
이번 실험은 우리가 이론상으로만 알고 있던 DNA를 직접 추출해 눈으로 관찰해 봄으로써 DNA에 대한 이해를 높이고 겔로딩 과정을 익혀볼 수 있는 실험이다. 그래서 이번 실험에는 구하기가 쉽고 실험하기 안전한 대장균의 DNA를 직접 추출해보고, 전기영동을 한 뒤 UV lamp를 통해 관찰해 보았다.
먼저, 대장균을 원심 분리시켜서 추출해 낸 뒤 EDTA 용액을 통해 세포벽을 제거하고, 10% SDS 용액을 이용해 세포막을 파괴시킨 다음 NaOH 용액을 사용해 DNA를 용해시킨다. 그러면 모든 세포소기관 및 DNA가 수용액 속에 전부다 녹아들어 용액이 맑아지게 되는데 여기에 NaCl과 95% EtOH를 넣어주어 DNA가 뭉쳐지도록 만들어 DNA를 침전시킨다. 그 후 침전된 DNA를 유리막대로 감아 추출해낸 뒤 DNA에 loading buffer을 첨가하고 겔 전기영동을 시킨다. 그렇게 완료된 겔 전기영동을 UV lamp를 통해 관찰해 보면 DNA와 Plasmid, RNA 등을 관찰해볼 수 있다.
2. Introduction
대장균은 주로 포유류의 장속에 사는 세균으로, 특히 대장에 많이 존재한다 하여 대장균이라 불린다. 대부분의 대장균과 그의 변종은 해롭지 않지만, 일부 대장균들은 사람에게 식중독을 일으키며, 가끔 대규모의 식품 리콜의 원인이 된다. 해롭지 않은 대장균들은 인간의 공생동물이며 비타민 K2등을 생산하여 이로움을 주기도 하며, 창자에서 병의 원인이 되는 박테리아의 번식을 막기도 한다. 대장균은 창자에만 있는 것은 아니나 밖으로 방출되더라도 장관내 이외의 자연계에서는 보통 증식이 되지 않는다. 또한 쉽게 번식하고 유전적으로 단순하고 다루기 쉽고 안전하여 가장 많이 연구된 원핵생물의 표본생물이며, 바이오테크놀로지에서도 중요하게 쓰인다. 따라서 이번 실험에서도 대장균이 실험하기 매우 용이하기 때문에 DNA추출 대상을 대장균으로 정하였다.
....
-
[미생물학 실험] 세포로부터의 DNA 분리, 정제
식물과 대장균의 genomic DNA 분리,추출의 차이점 생세포로부터의 DNA 분리, 정제 유전 공학을 위한 DNA분리는 3가지 유형으로 구분할 수 있다. 1. 제 1 타입은 세포 전체 DNA(total cell DNA)이며 클로닝될 유.. -
plasmid DNA 추출 보고서
plasmid DNA 추출 1. 서론 분자생물학의 도움으로 생물체 내의 여러 가지 생화학적 반응의 조절과 질병의 치료에 대한 이해가 분자적 수준에서 이루어지고 있다. DNA의 생물체 내에서의 이러한 작용이 밝혀짐에.. -
[생물학 실험] DNA의 분리 실험
1. Abstract Introduction DNA 절편을 클로닝하기 위한 방법들의 공통된 특징 중 하나는 박테리아와 플리스미드를 이용하는 것이다. 박테리아 플라스미드는 비교적 작고, 염색체로부터 분리된 상태로 복제하는 원.. -
일반생물학 - DNA 추출 및 PCR PCR 결과 확인(전기영동)
DNA 추출 및 PCR PCR 결과 확인(전기영동) 1. 실험 목적(Purpose of experiment) (1) 쥐의 근육세포에서 DNA를 추출하여 중합효소 연쇄 반응(polymerase chain reaction, PCR) 실험에 이용할 product를 만든다... -
생물학실험 - DNA 추출, PCR의 원리 및 실험
생물학실험 - DNA 추출, PCR의 원리 및 실험 [실험 방법] -DNA 추출 1. Solution 1 2. Solution 2 3. Solution 3 4. Washing 5. Elution -PCR 1. PCR tube에 dNTPs buffer 4 l와 reaction buffer 5 l를 넣는다. 2.. -
일반생물학 실험 - mini preparation(plasmid DNA를 소량 분리하는 방법)실험
Title : Mini Preparation Objective : DNA의 크기차이에 의해 분리하는 방법인 alkaline lysis method를 이용하여 정제된 DNA의 양을 불린다. Introduction 유전자 재조합은 DNA를 목적에 따라 적절히 자르고 .. -
실험보고서 - 단백질과 DNA의 정량
1. 실험제목 : 단백질과 DNA의 정량 2. 실험목적 : - 단백질을 구성하는 아미노산의 구조와 특성을 이해하고 아미노산의 특성을 이용한 몇 가지 단백질 정량 방법을 이해한다 - 대표적인 단백질 정량방법인 Bradfo.. -
일반생물학 실험 - Mini Preparation
Title : Mini Preparation Objective : DNA의 크기차이에 의해 분리하는 방법인 alkaline lysis method를 이용하여 정제된 DNA의 양을 불린다. Introduction 유전자 재조합은 DNA를 목적에 따라 적절히 자르고 .. -
형질전환 실험 - 대장균 DNA 전기영동 관찰
형질전환 실험 - 대장균 DNA 전기영동 관찰 ◆준비물 아이스버킷 아이스 Competent cell SOC 항온수조 E tube 원심분리기 Colume tube P1 250ml P2 250ml N3 350ml PB 500ml PE 750ml EB 50ml ◆실험목적 LB pla.. -
딸기 DNA 추출 실험 보고서
[딸기 DNA 추출] ◎ 실험의 이론적 배경 - DNA는 유전물질의 기능을 한다. 핵산은 자연계의 모든 분자들 중에서 자가복제를 할 수 있는 유일한 분자이다. 부모와 그 자손의 유사성은 DNA의 정확한 복제 및 복제된..
- 프로이드 정신분석이론 기본개념과 사례분석 및 프로이드 정신분석이론 성과 및 한계점과 비평 및 나의의견
- [죽음과 임종] 죽음의 정의, 발달단계와 죽음의 의미, 죽음에 대한 태도, 죽음 전의 심리적 변화, 호스피스간호
