[미생물학 실험] 세포로부터의 DNA 분리, 정제
[미생물학 실험] 세포로부터의 DNA 분리, 정제
식물과 대장균의 genomic DNA 분리,추출의 차이점
생세포로부터의 DNA 분리, 정제
유전 공학을 위한 DNA분리는 3가지 유형으로 구분할 수 있다.
1. 제 1 타입은 세포 전체 DNA(total cell DNA)이며 클로닝될 유전자를 얻기 위해 필요.
2. 제 2 타입은 순수한 플라스미드 DNA이며 분리방법은 기본적으로 total cell DNA분리와 같지만 어느 단계에서는 염색체 DNA와 분리되어야 한다.
3. 제 3 타입은 파지 DNA이 며 파지 클로닝 벡터로 이용될 때 필요. 파지 DNA는 감염세포로부터 보다는 파지 자체에서 분리되는 것이 일반적이기 때문에 세균 DNA에 의해 오염되는 문제는 없다. 그러나 파지 캡시드(단백질)를 제거하기 위해선 특수한 방법이 필요하다. 예외적으로 대장균(E. coli) 세포로부터 M13의 dsRF를 분리할 때는 플라스미드 분리 때와 같은 방법이 사용된다.
3.1 Total cell DNA의 분리
세균 세포의 배양물로부터 total DNA를 준비하는 방법은 4 단계로 나눌 수 있다.
①세포배양액 - 증식, 수확(원심분리 이용)
②세포파괴 - 내용물 방출
③DNA만 분리 - 단백질 제거(페놀 처리), RNA제거(Rnase 처리)
④DNA 농축 - 2 vol.의 에탄올(EtOH) 처리
3.1.1 세균 배양물의 증식 및 수확
4. Defined medium : 배지의 모든 구성성분이 알려져 있는 배지로 정밀하게 통제되는 조건에서 세균 배양물을 증식시켜야 할 때 사용.
5. Undefined medium : 배지의 구성성분에 대한 자세한 성분명과 함량이 알려져 있지 않은 배지로 단순히 DNA분리를 위한 경우에 적절.
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생세포로부터의 DNA 분리, 정제
유전 공학을 위한 DNA분리는 3가지 유형으로 구분할 수 있다.
1. 제 1 타입은 세포 전체 DNA(total cell DNA)이며 클로닝될 유전자를 얻기 위해 필요.
2. 제 2 타입은 순수한 플라스미드 DNA이며 분리방법은 기본적으로 total cell DNA분리와 같지만 어느 단계에서는 염색체 DNA와 분리되어야 한다.
3. 제 3 타입은 파지 DNA이 며 파지 클로닝 벡터로 이용될 때 필요. 파지 DNA는 감염세포로부터 보다는 파지 자체에서 분리되는 것이 일반적이기 때문에 세균 DNA에 의해 오염되는 문제는 없다. 그러나 파지 캡시드(단백질)를 제거하기 위해선 특수한 방법이 필요하다. 예외적으로 대장균(E. coli) 세포로부터 M13의 dsRF를 분리할 때는 플라스미드 분리 때와 같은 방법이 사용된다.
3.1 Total cell DNA의 분리
세균 세포의 배양물로부터 total DNA를 준비하는 방법은 4 단계로 나눌 수 있다.
①세포배양액 - 증식, 수확(원심분리 이용)
②세포파괴 - 내용물 방출
③DNA만 분리 - 단백질 제거(페놀 처리), RNA제거(Rnase 처리)
④DNA 농축 - 2 vol.의 에탄올(EtOH) 처리
3.1.1 세균 배양물의 증식 및 수확
4. Defined medium : 배지의 모든 구성성분이 알려져 있는 배지로 정밀하게 통제되는 조건에서 세균 배양물을 증식시켜야 할 때 사용.
5. Undefined medium : 배지의 구성성분에 대한 자세한 성분명과 함량이 알려져 있지 않은 배지로 단순히 DNA분리를 위한 경우에 적절.
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실험 15주차_플라스미드 DNA 분리 결과 Report
실험 제목 : 플라스미드 DNA 분리 플라스미드 DNA 분리-Harvestingstep 플라스미드 DNA 분리-Resuspens ionstep 플라스미드 DNA 분리-Lys isstep 플라스미드 DNA 분리-Bindingstep 플라스미드 DNA 분리-Washstep .. -
생명과학 - 타액의 상피세포와 근유조직세포, 혈액의 백혈구 등으로 부터 DNA를 추출, 정제해내는 실험
Abstract .... -
일반생물학 실험 - mini preparation(plasmid DNA를 소량 분리하는 방법)실험
Title : Mini Preparation Objective : DNA의 크기차이에 의해 분리하는 방법인 alkaline lysis method를 이용하여 정제된 DNA의 양을 불린다. Introduction 유전자 재조합은 DNA를 목적에 따라 적절히 자르고 .. -
[생명공학 Plasmid DNA preparation
(1) 실험 제목 : Plasmid DNA preparation (2) 실험 목적 : Ampicillin에 대하여 저항성을 지닌 E. coli (XLI-Blue, Amp-r) 의 plasmid DNA【pBluescript SKⅡ(+)】를 isolation 한다. (3) 실험 원리 : Plasmid.. -
전기 영동 결과 Report
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생물학 실험 - Fungal Genomic DNA 분리(콩 DNA 관찰)
1.Subject Fungal Genomic DNA 분리(콩 DNA 관찰) 2.Priciple DNA는 핵산의 일종으로 유전자의 본체다. 핵산은 뉴클레오티드(nucleotide)라고 하는 단위물질이 많이 연결된 고분자 유기물이다. 이 뉴클레오티드는.. -
[생물학 실험] DNA의 분리 실험
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생물학 실험 - 세포 배양(cell culture)
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