서론
[1]plasmid란
세포 내에서 핵이나 염색체와 독립적으로 존재하면서 자율적으로 자가증식해 자손에 전해지는 유전요인이다. 1952년에 미국의 유전학자 J.레더버그가 세균류의 염색체 이외의 유전요인을 플라스미드라고 명명했는데, 최근에는 진핵생물도 포함해 세포질 인자와 같은 뜻으로 흔히 쓰인다.
plasmid의 특징
1)원형의 이중가닥 DNA(circular double-standed DNA)이다
2)세포내에서 염색체 DNA와는 별개로 존재
3)자기 스스로 복제가 가능
4)대부분 세균에 존재하나, 일부 진핵세포에도 존재
5)복제기점(DNA 복제의 시작점으로 숙주 범위 및 plasmid DNA의 copy를 결정)이 존재한다
6)항생제 저항성 유전자(R인자)를 가진다.
7)다중 제한효소 클로닝 부위(Multi cloning site, MCS)가 존재
[2]‘원심분리’란
원심분리는 고체와 고체를 둘러싼 액체 간의 밀도차를 이용한다. 부유물이 있는 현탁액을 가만히 두면 밀집한 고체는 중력의 영향으로 서서히 가라앉게 되는데 이러한 과정이 침전
(sedimentation)이다. 서서히 침전되는 것을 원심력을 이용하여 가속하는 과정을 원심분리
(centrifugation)라 한다. 따라서 침전과 원심분리는 유사하다. 침전(sedimentation)에 비해 원심분리는 다음과 같은 장단점을 가지고 있다.
원심분리는 공정을 계속적으로 반복할 수 있고, 많은 양을 짧은 시간안에 처리할 수 있으며, 멸균상태에서 조업이 용이하다. 그러나 설치자본 및 유지비용이 많이 들며, 에너지 소모가 많고 슬러리(slurry) 형태의 농축 등이 문제점이 될 수 있다.
원심분리는 산업적으로 생물적 분리의 첫번째 단계로써 사용되어진다. 예를 들면 발효된 맥
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[생명공학 Plasmid DNA preparation (1) 실험 제목 : Plasmid DNA preparation
(2) 실험 목적 : Ampicillin에 대하여 저항성을 지닌 E. coli (XLI-Blue, Amp-r) 의 plasmid
DNA【pBluescript SKⅡ(+)】를 isolation 한다.
(3) 실험 원리 :
Plasmid..
[생물학 실험] DNA의 분리 실험 1. Abstract Introduction
DNA 절편을 클로닝하기 위한 방법들의 공통된 특징 중 하나는 박테리아와 플리스미드를 이용하는 것이다. 박테리아 플라스미드는 비교적 작고, 염색체로부터 분리된 상태로 복제하는 원..
생물학실험 - DNA 추출, PCR의 원리 및 실험 생물학실험 - DNA 추출, PCR의 원리 및 실험
[실험 방법]
-DNA 추출
1. Solution 1
2. Solution 2
3. Solution 3
4. Washing
5. Elution
-PCR
1. PCR tube에 dNTPs buffer 4 l와 reaction buffer 5 l를 넣는다.
2..
plasmid DNA 추출 보고서 plasmid DNA 추출
1. 서론
분자생물학의 도움으로 생물체 내의 여러 가지 생화학적 반응의 조절과 질병의 치료에 대한 이해가 분자적 수준에서 이루어지고 있다. DNA의 생물체 내에서의 이러한 작용이 밝혀짐에..
Plasmid Purification Plasmid Purification
1. 실험 목적
①plasmid의 화학적 분리법을 익힌다.
②plasmid의 정의와 특징을 알아본다.
③균의 pure culture에 대해 알아본다.
④전기영동, 원심분리 등의 사용법을 익힌다.
2.실험 원리
①B..
DNA 증폭실험 DNA 증폭실험
1. 실험 목적
생명공학의 기초가 되는 분자 생물학의 기본 기술인 DNA를 다루는 기술을 알아본다.
미생물에서 Plasmid DNA를 분리하고, PCR을 이용하여 DNA를 증폭하고, 제한효소를 이용하여 DNA를 ..
생물학 실험보고서 - DNA work [생물학실험보고서]
1. 실험 제목 : DNA work
2. 실험 목적 : 세균의 세포벽을 파괴하고 plasmid DNA를 분리한다. 분리한 plasmid DNA를 형질전환을 시키고 배지에서 키운다. 배지에서 키운후 제한효소를 이용해..
생물학 실험 - 박테리아 유전 형질전환(genetics transformation) Title: Bacterial Genetics
Introduction
Griffith에 의한 세균의 형질전환(transformation) 실험은 DNA가 유전물질이라는 사실의 증명뿐만 아니라, 생명현상을 분자수준에서 해명하려고 하는 분자 유전학의 태..