DNA 증폭실험
DNA 증폭실험
DNA 증폭실험
1. 실험 목적
생명공학의 기초가 되는 분자 생물학의 기본 기술인 DNA를 다루는 기술을 알아본다.
미생물에서 Plasmid DNA를 분리하고, PCR을 이용하여 DNA를 증폭하고, 제한효소를 이용하여 DNA를 절단한 후 Mini Gel Unit를 이용하여 전기영동법에 의해 DNA를 분리하고 확인한다. Plasmid DNA를 이용하여 미생물 형질전환을 한 후 미생물 형질전화체 선별하는 기술까지 분자생물학을 공부하는데 필수적인 실험 기술을 습득한다.
2. 실험도구
1) Gradient PCR
용도 : 정확한 온도조절을 할 수 있는 기기로써 Taq polymerase를 이용하여 소량의 특정한 DNA를 대량 증폭하는데 이용한다. 또한 cell로부터 분리된 mRNA를 이용하여 cDNA의 합성에도 이용가능하다.
특징 : 특정 DNA의 대량 증폭을 위해 25~30 cycle을 반복해야 하는데 이때 정확한 온도와 시간 조절이 필요하다. 기기 내부에 작은 홈이 있어 홈 안에 PCR mixture가 들어 있는 작은 tube를 장착하게 되는데 각 홈 안의 온도 변화 또한 민감하다고 할 수 있다. PCRmachine은 온도 변화에 있어 미묘한 차이와 시간을 적절히 조절하는 기기라 할 수 있다.
2)Mini Gel Electrophoresis Units(Mupid 21)
용도 : 단백질이나 핵산 등의 고분자 물질은 하전을 띄므로 이를 기초로 하여 이들 분자를 전기장을 띤 매질(gel)에서 이동 분리 시켜 이들의 순도나 성질의 분석 및 분리 등에 사용하는 Mini Gel 전기영동 장치
특징 : Agarose, polyacrylamide, SDS polyacrylamide gel 모두 사용 가능
가볍고 단단하고 안전하고 사용하기가 쉽다.
power supply 내장
Nucleic acid와 Protein 분리를 위해 사용 가능
3. 실험시 주의 사항
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1. 실험 목적
생명공학의 기초가 되는 분자 생물학의 기본 기술인 DNA를 다루는 기술을 알아본다.
미생물에서 Plasmid DNA를 분리하고, PCR을 이용하여 DNA를 증폭하고, 제한효소를 이용하여 DNA를 절단한 후 Mini Gel Unit를 이용하여 전기영동법에 의해 DNA를 분리하고 확인한다. Plasmid DNA를 이용하여 미생물 형질전환을 한 후 미생물 형질전화체 선별하는 기술까지 분자생물학을 공부하는데 필수적인 실험 기술을 습득한다.
2. 실험도구
1) Gradient PCR
용도 : 정확한 온도조절을 할 수 있는 기기로써 Taq polymerase를 이용하여 소량의 특정한 DNA를 대량 증폭하는데 이용한다. 또한 cell로부터 분리된 mRNA를 이용하여 cDNA의 합성에도 이용가능하다.
특징 : 특정 DNA의 대량 증폭을 위해 25~30 cycle을 반복해야 하는데 이때 정확한 온도와 시간 조절이 필요하다. 기기 내부에 작은 홈이 있어 홈 안에 PCR mixture가 들어 있는 작은 tube를 장착하게 되는데 각 홈 안의 온도 변화 또한 민감하다고 할 수 있다. PCRmachine은 온도 변화에 있어 미묘한 차이와 시간을 적절히 조절하는 기기라 할 수 있다.
2)Mini Gel Electrophoresis Units(Mupid 21)
용도 : 단백질이나 핵산 등의 고분자 물질은 하전을 띄므로 이를 기초로 하여 이들 분자를 전기장을 띤 매질(gel)에서 이동 분리 시켜 이들의 순도나 성질의 분석 및 분리 등에 사용하는 Mini Gel 전기영동 장치
특징 : Agarose, polyacrylamide, SDS polyacrylamide gel 모두 사용 가능
가볍고 단단하고 안전하고 사용하기가 쉽다.
power supply 내장
Nucleic acid와 Protein 분리를 위해 사용 가능
3. 실험시 주의 사항
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