1. Introduction
1)PCR
PCR 이란 DNA의 원하는 부분 (target sequence)을 증폭하는 방법이다.
denaturation, annealing, extension 3가지 과정으로 구성되어 있고
이 과정이(circle) 반복 되면서 DNA가 증폭된다.
PCR 과정
1단계[denaturation]-약 95도 정도에서 1~2분 정도 진행된다. 온도가 높아지면서 DNA사이에 있는 염기 사이에 있는 수소결합이 끊어져 DNA가 두가닥으로 나눠진다.
2단계[annealing]- 약 60도 정도에서 30초 정도 진행된다. 분리된 DNA가닥에 primer이 결합되는 과정이다. Primer은 각각 target sequence에 따라 달라진다(상응하는 DNA 염기서열이 다르다) primer에 따라 온도와 시간이 달라진다.
3단계[extension]- 약 72도에서 2분정도 진행된다. taq polymerase가 합성되어 primer에서 DNA가 뻗어나간다.
pcr 구성요소
primer-PCR의 가장 중요한 요소로써 정확도를 결정한다. primer이 길경우
taq polymerase-바다 밑 뜨거운 곳에 사는 생명체로부터 추출한 효소로써 열 저항성이 높아 95도 까지 올라가는 extenstion 과정에서 이용되기에 적합하다.
dNTP(GATC solution 용액)-중합효소의 양을 늘려준다.
PCR buffer-Taq polymerase가 잘 활성화 될 수 있도록 도와주는 이온
2)전기영동
DNA를 크기에 따라 분리하는 방법이다. DNA는 phostphate group에서 음전하를 띄기 때문에 두 전극 사이에서 있을 때 양 전극으로 이동한다.
전기영동 구성요소
Agarose gel-투명하고 사용이 간편하며 DNA측정에 적합하다
TAE buffer-pH를 안정화 시키는 완충용액으로 전기영동 시 DNA를 이동시키는 운반체들이 이온이고 이런 이온을 buffer가 공급해준다.
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DNA 증폭실험 DNA 증폭실험
1. 실험 목적
생명공학의 기초가 되는 분자 생물학의 기본 기술인 DNA를 다루는 기술을 알아본다.
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1. 실험 목적(Purpose of experiment)
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박테리어 파지 DNA의 분리
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1. Abstract
이번 실험은 우리가 이론상으로만 알고 있던 DNA를 직접 추출해 눈으로 관찰해 봄으로써 DNA에 대한 이해를 높이고 겔로딩 과정을 익혀..
제한효소를 통한 DNA 분해와 전기 영동 [제한효소를 통한 DNA 분해와 전기 영동]
1. 실험 제목
이번 실험에서는 8주차 실험에서 추출해낸 DNA를 제한 효소를 사용하여 여러 개의 DNA 조각으로 분리한 후, 전기영동을 통하여 원하는 DNA 분자가 유입되..
생물학 실험 보고서 - 전기영동 보고서 생물학 실험 보고서
소속
학번
이름
실험날짜
현미경번호
실험제목
전기영동
실험목적
전기영동의 원리를 이해하고 아가로오스 전기영동의 수행과정을 이해하고 아가로오스 젤 전기영동시 DNA 이동에 영향..