실험보고서 - 단백질의 전기영동
실험보고서 - 단백질의 전기영동
단백질의 전기영동
1.실험방법
1)전기영동키트를 제작한다.
2)수직방향으로 comb를 조심스럽게 제거한다. 이때 comb를 제거한 후 형성된 well이 손상되지 않도록 주의한다.
3)Comb를 제거한 후 즉시 주사기를 사용하여 각 well을 SDS-PAGE running 완충용액으로 수회에 걸쳐 세척한다.
4)준비된 시료(catalase, lysozyme, albumin, whole cell lysate, protein size marker) 를 각 well에 각각 가한 후 200V로 1시간 정도 전기영동한다.
5)전기영동이 끝나면 전기영동기구를 해체하고 gel판을 떼어낸다.
6)유리판과 뒤쪽의 판이 깨지지 않도록 주의하고 gel이 찢어지지 않도록 한 다.
7)전기영동이 끝난 gel을 Coomassie Brilliant Blue로 염색한다.
8)Destaining을 하여 실험결과를 관찰한다.
2. 실험결과
4조의 실험은 왼쪽부터 1, 2, 3, 4, 5 lane이다.
1번 lane : 파란 줄이 gel 밑 부분에 몰려있다.
2번 lane : 파란 줄이 gel 중간부분부터 분리되어 있다.
3번 lane : 파란 줄이 gel 전반적으로 펼쳐져 있고 2개의 줄은 주황색으로 염색되어 있다.
4번 lane : 파란 줄이 중간 부분에 몰려 있다.
5번 lane : 파란 줄이 gel에 매우 촘촘히 분포되어 있다.
3. 실험고찰
1) 각 lane별 분석
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1.실험방법
1)전기영동키트를 제작한다.
2)수직방향으로 comb를 조심스럽게 제거한다. 이때 comb를 제거한 후 형성된 well이 손상되지 않도록 주의한다.
3)Comb를 제거한 후 즉시 주사기를 사용하여 각 well을 SDS-PAGE running 완충용액으로 수회에 걸쳐 세척한다.
4)준비된 시료(catalase, lysozyme, albumin, whole cell lysate, protein size marker) 를 각 well에 각각 가한 후 200V로 1시간 정도 전기영동한다.
5)전기영동이 끝나면 전기영동기구를 해체하고 gel판을 떼어낸다.
6)유리판과 뒤쪽의 판이 깨지지 않도록 주의하고 gel이 찢어지지 않도록 한 다.
7)전기영동이 끝난 gel을 Coomassie Brilliant Blue로 염색한다.
8)Destaining을 하여 실험결과를 관찰한다.
2. 실험결과
4조의 실험은 왼쪽부터 1, 2, 3, 4, 5 lane이다.
1번 lane : 파란 줄이 gel 밑 부분에 몰려있다.
2번 lane : 파란 줄이 gel 중간부분부터 분리되어 있다.
3번 lane : 파란 줄이 gel 전반적으로 펼쳐져 있고 2개의 줄은 주황색으로 염색되어 있다.
4번 lane : 파란 줄이 중간 부분에 몰려 있다.
5번 lane : 파란 줄이 gel에 매우 촘촘히 분포되어 있다.
3. 실험고찰
1) 각 lane별 분석
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