[생물학 실험] 전기영동 실험
[생물학 실험] 전기영동 실험
1. Introduction
․ 전기영동
입자가 아닌 액체가 고정된 막(膜)을 통과하는 것을 전기삼투(electroosmosis)라고 한다. 스웨덴의 화학자인 아르네 티셀리우스가 1930년경에 전기영동을 분석기술로 이용하는 방 법을 처음 소개했으며, 그가 고안한 이동경계법은 콜로이드 입자를 포함하고 있는 특정 액체 위에 콜로이드 입자를 포함하지 않는 순수한 액체를 첨가했을 경우에 나타나는 2가 지 액체의 경계가 콜로이드 입자의 전기영동속도로 이동한다는 사실을 밝혔다. 전기영동 은 단백질과 같은 콜로이드성 물질을 분석하거나 분리할 경우 전자관에 사용하는 부품 등 을 코팅할 때 사용한다. 특히 생물학 연구에 많이 쓰이고 있는데, 생물을 구성하고 있는 단백질․핵산 등 많은 분자들은 전기를 띠고 있어서 전기장 속에서 각 분자가 특징적인 이동을 한다. 이러한 성질을 이용해 생물을 구성하고 있는 물질의 분자량 측정, 각 물질의 전기량이나 형태의 차이를 이용한 물질의 분리 등에 전기영동법이 자주 사용되고 있다. 전기영동법은 실험 목적에 따라 매우 다양한 종류로 발달되어왔다. 전기장을 걸어 분자 들을 이동시키는 매질로 가장 흔히 사용되는 것으로 겔(gel)을 들 수 있고 그밖에 종이를 사용하는 경우도 있다. 겔을 만드는 재료에 따라 폴리아크릴아미드(polyacrylamide)․ 전분
․ 아가로즈(agarose) 등 여러 종류가 있다.
2. Materials
Restriction enzyme, enzyme buffer, 1kb marker, loading dye,
1x TAE buffer, agarose, EtBr, electrophoresis kit, gel 판, comb, hand detector
3. Methods
(1)준비해 둔 DNA로 제한효소를 반응시킨다.
1] No cut의 경우 조성비율
D.W. 7ul
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․ 전기영동
입자가 아닌 액체가 고정된 막(膜)을 통과하는 것을 전기삼투(electroosmosis)라고 한다. 스웨덴의 화학자인 아르네 티셀리우스가 1930년경에 전기영동을 분석기술로 이용하는 방 법을 처음 소개했으며, 그가 고안한 이동경계법은 콜로이드 입자를 포함하고 있는 특정 액체 위에 콜로이드 입자를 포함하지 않는 순수한 액체를 첨가했을 경우에 나타나는 2가 지 액체의 경계가 콜로이드 입자의 전기영동속도로 이동한다는 사실을 밝혔다. 전기영동 은 단백질과 같은 콜로이드성 물질을 분석하거나 분리할 경우 전자관에 사용하는 부품 등 을 코팅할 때 사용한다. 특히 생물학 연구에 많이 쓰이고 있는데, 생물을 구성하고 있는 단백질․핵산 등 많은 분자들은 전기를 띠고 있어서 전기장 속에서 각 분자가 특징적인 이동을 한다. 이러한 성질을 이용해 생물을 구성하고 있는 물질의 분자량 측정, 각 물질의 전기량이나 형태의 차이를 이용한 물질의 분리 등에 전기영동법이 자주 사용되고 있다. 전기영동법은 실험 목적에 따라 매우 다양한 종류로 발달되어왔다. 전기장을 걸어 분자 들을 이동시키는 매질로 가장 흔히 사용되는 것으로 겔(gel)을 들 수 있고 그밖에 종이를 사용하는 경우도 있다. 겔을 만드는 재료에 따라 폴리아크릴아미드(polyacrylamide)․ 전분
․ 아가로즈(agarose) 등 여러 종류가 있다.
2. Materials
Restriction enzyme, enzyme buffer, 1kb marker, loading dye,
1x TAE buffer, agarose, EtBr, electrophoresis kit, gel 판, comb, hand detector
3. Methods
(1)준비해 둔 DNA로 제한효소를 반응시킨다.
1] No cut의 경우 조성비율
D.W. 7ul
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