유전공학 - Transformation의 원리와 종류
유전공학 - Transformation의 원리와 종류
Transformation의 원리
E.coli는 linear 또는 circular DNA를 받아들일 수 있는데, 이러한 과정을 transformation이라 하며 다음과 같은 단계를 거쳐 이루어진다. E.coli cell이 DNA를 uptake 할 수 있는 상태(competent)로 만들어 주기위해 E.coli cell을 Ca과 같은 multivalent ion의 존재 하에 0℃에서 incubation한다. 이때, cation은 E.coli cell membrane에 존재하는 lipid의 negatively charged phosphate와 complex를 이룰 것으로 추정된다. 낮은 온도는 cell membrane을 응고시켜 charged phosphate의 분포를 안정화하여 cation에 의하여 효과적으로 shield되게 하여준다. 이때 37℃~42℃로 heat shock을 가하면 E.coli membrane내외의 thermal imbalance가 생겨 DNA가 세포 안으로 빨려 들어가게 된다. 이외에 electroporation에 의한 transformation으로 electric charge를 E.coli cell에 순간적으로 가하여 이때 생긴 pore를 통해 DNA를 세포 안으로 넣는 방법이 있다. Host cell로 들어간 DNA는 ampicillin내성 유전자(Beta lactamase를 cording하는 유전자)가 포함된 plasmid를 사용하여 ampicillin이 포함된 배지에서 선별해서 확인한다.
Transformation의 종류
가) 전기 충격법(Electroporation)
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E.coli는 linear 또는 circular DNA를 받아들일 수 있는데, 이러한 과정을 transformation이라 하며 다음과 같은 단계를 거쳐 이루어진다. E.coli cell이 DNA를 uptake 할 수 있는 상태(competent)로 만들어 주기위해 E.coli cell을 Ca과 같은 multivalent ion의 존재 하에 0℃에서 incubation한다. 이때, cation은 E.coli cell membrane에 존재하는 lipid의 negatively charged phosphate와 complex를 이룰 것으로 추정된다. 낮은 온도는 cell membrane을 응고시켜 charged phosphate의 분포를 안정화하여 cation에 의하여 효과적으로 shield되게 하여준다. 이때 37℃~42℃로 heat shock을 가하면 E.coli membrane내외의 thermal imbalance가 생겨 DNA가 세포 안으로 빨려 들어가게 된다. 이외에 electroporation에 의한 transformation으로 electric charge를 E.coli cell에 순간적으로 가하여 이때 생긴 pore를 통해 DNA를 세포 안으로 넣는 방법이 있다. Host cell로 들어간 DNA는 ampicillin내성 유전자(Beta lactamase를 cording하는 유전자)가 포함된 plasmid를 사용하여 ampicillin이 포함된 배지에서 선별해서 확인한다.
Transformation의 종류
가) 전기 충격법(Electroporation)
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유전인자의 재조합
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[화학공학실험] 기기분석-FT 결과 (Fourier transform spectroscopy )
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분자유전학
분자유전학 Gene (유전자) - 하나의 단백질을 만들기 위해 필요한 유전정보를 담고 있는 최소의 유전단위 Central dogma 유전정보를 담고 있는 유전물질 (DNA)을 바탕으로 유전정보의 전달자인 RNA를 통해 세포.. -
유전공학 실험 - PCR과 Transformation
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유전공학의 종류와 장단점
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생물학 실험 - 박테리아 유전 형질전환(genetics transformation)
Title: Bacterial Genetics Introduction Griffith에 의한 세균의 형질전환(transformation) 실험은 DNA가 유전물질이라는 사실의 증명뿐만 아니라, 생명현상을 분자수준에서 해명하려고 하는 분자 유전학의 태.. -
일반생물학 실험 - Griffith에 의한 세균의 형질전환(transformation) 실험
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[실험보고서] 항생제의 항균활성 및 대장균 형질전환
1. 실험목적 : 박테리아의 유전형질을 플라스미드를 이용하여 형질전환 시키고 형질전환 된 박테리아를 선택하는 과정을 이해한다. 2. 실험원리 : 외부로부터 주어진 DNA를 받아들여 생물체의 유전적인 성질이 변.. -
생명공학의 발전과 생명윤리
생명공학의 발전과 생명윤리 7.1 생명공학 시대의 도래 7.1.1 생명공학(Biotechnology)의 의미 - 생명과학의 학문적 성과를 바탕으로 실생활과 산업에 활용하는 생명현상과 관련된 다양한 기술 전반 - 생.. -
한국인의 신관이해를 통한 복음전달 방안 연구-김상수 발제논문
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