생명화학실험 - RT-PCR, Bradford assay, SDS page, Genomic DNA prep
생명화학 실험 Report
(RT-PCR, Bradford assay, SDS page,
Genomic DNA prep)
1.Introduction
RT-PCR
DNA 에서는 exon과 intron이 있으므로 DNA를 template로 하는 경우에는 exon과 intron이 모두 증폭될 수 있다. 하지만 intron은 exon에 비해서 매우 크기 때문에 exon 중에 몇 개를 한꺼번에 증폭하려면 DNA로는 힘들다. 더구나 intron sequence는 일부를 제외하고는 중요성이 떨어진다고 인식되어 밝히지 않은 것이 많아 GenBank에서도 찾을 수 없는 경우가 많다. 이러한 이유 때문에 mRNA를 template로 해서 PCR하는 방법을 RT-PCR(Reverase Transcriptase-Polymerase Chain Reaction)이라고 합니다. 이 경우는 앞에서 설명한 PCR을 시행하기 이전에 RNA로부터 DNA를 합성해 주는 효소(RNA-dependent DNA polymerase)인 reverse transcriptase를 처리한다.
맨 먼저 reverse transcriptase로 RNA를 complementary DNA(cDNA)로 역한다. 이때는 downstream primer만 사용하게 되는데 왜냐하면 RNA는 single strand이기 때문이다. 그 후 생성된 cDNA에서 일반적인 PCR의 과정을 밟아서 유전자를 증폭한다.
downstream primer는 크게 mRNA 뒤에 poly(A) tail이 붙는 것을 응용한 oligo(dT) primer, gene specific primer, 그리고 여기저기 붙는 random primer 이렇게 3가지가 존재한다.
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실험보고서 - 단백질과 DNA의 정량 1. 실험제목 : 단백질과 DNA의 정량
2. 실험목적 :
- 단백질을 구성하는 아미노산의 구조와 특성을 이해하고 아미노산의 특성을 이용한 몇 가지 단백질 정량 방법을 이해한다
- 대표적인 단백질 정량방법인 Bradfo..
세포 생화학 및 실험 - PCR의 종류와 응용의 예 ♥ PCR의 종류와 응용의 예
◈ PCR의 종류
다음과 같은 종류들이 있다.
CML PCR
HCV-PCR
HCV RT-PCR
HPV PCR
Nested TB-PCR
Nested RT-PCR
Mycoplasma-PCR
ALL RT-PCR
Chlamydia-PCR
MULTIPLEX PCR
모든 PCR종류에..
[실험보고서] 단백질정량 bradford 실험 - 예비와 결과 보고서 [예비 레포트]
1. 실험 목적
Bradford Assay를 사용하여 이미 정량된 특정 단백질을 정량하고, 이를 통해 미지의 단백질을 정량한다.
2. 실험 원리
단백질이 당질이나 지질과 다른 점은 탄소, 수소 그리고 산소 ..
일반생물학 실험 - Polymerase chain reaction(PCR) Polymerase chain reaction(PCR) technique은 1980년대 중반 K. Mullis에 의해서 고안된 기술이다. 이 PCR techinique은 유전자를 연구, 분석하는 분자유전학에 혁신을 일으켰다. 유전자를 분석하고 연구하는데 있..
[생화학실험] 단백질 정량 분석 - BCA법 SDS-PAGE 분석 Western Blot 실험 일시:
1. 제목 : 단백질 정량 분석 – BCA법 SDS-PAGE 분석 Western Blot
2. 실험 목적
: BCA Method를 이용하여 우유 중의 단백질 함량을 분석하고 SDS-PAGE와 Coomassie Blue 염색을 통해 단백질의 전기영..
pcr과 형질전환 PCR
Polymerase chain reaction(PCR) technique은 1980년대 중반 K. Mullis에 의해서 고안된 기술이다. 이 PCR techinique은 유전자를 연구, 분석하는 분자유전학에 혁신을 일으켰다. 유전자를 분석하고 연구하는..
전기영동,마케팅,브랜드,브랜드마케팅,기업,서비스마케팅,글로벌,경영,시장,사례 Agarose gel electrophoresis& Gel elution
전기영동
용액에 전류를 통했을 때 용액 중의 하전 입자가 양극 또는 음극으로 이동하는 현상
주로 단백질 관련 물질 또는 유사한 성질을 가진 물질이 대상
이동의 원..
[생물자료] PCR[유전자진단] 원리 및 실험 방법 [생물자료] PCR[유전자진단] 원리 및 실험 방법
유전자 진단 방법 - PCR
PCR(Polymerase Chain Reaction)법은 유전자 진단 방법중 하나로 특정 DNA 영역을시험 내에서 효소에 의해 증폭하는 방법이다. 1985년 Mul..
RT PCR ELIRA ※ RT-PCR-ELISA 대해서..
※ PCR (Polymerase Chain Reaction)
유전자 진단 방법중 하나로 특정 DNA 영역을 시험 내에서 효소에 의해 증폭하는 방법이다. PCR이 등징하기 전, DNA 진단을 위해서는 하프로이등당 3..