Polymerase chain reaction(PCR) technique은 1980년대 중반 K. Mullis에 의해서 고안된 기술이다. 이 PCR techinique은 유전자를 연구, 분석하는 분자유전학에 혁신을 일으켰다. 유전자를 분석하고 연구하는데 있어서 가장 큰 문제점은 복잡한 전체 genome중에 연구하고자 하는 유전자가 희귀하다는 것인데, PCR은 특정 DNA Sequence의 copy수를 기하급수적으로 증폭시킬 수 있다.
PCR은 DNA polymerase에 의한 DNA 복제의 특징을 이용한다. DNA polymerase가 외가닥 DNA를 주형으로 해서 상보적인 DNA를 합성한다. 이러한 외가닥 DNA는 두가닥 DNA를 끓임(denature, 변성)으로써 간단하게 얻을 수 있다. DNA polymerase가 DNA합성을 시작하게 위해서는 시작부위가 두가닥 DNA로 되어 있어야한다. 따라서, 증폭시킬 DNA sequence의 양 끝에 상보적으로 결합할 수 있는 작은 DNA조각(oligonucleotide primer)을 함께 넣어주면 이 primer가 특정 DNA sequence의 양 끝에 가서 결합(anneal)해 DNA polymerase가 DNA 합성을 시작할 수 있도록 해준다. 일단 primer가 결합한후에는 DNA polymerase의 작용으로 DNA 합성이 반대편 끝까지 진행(extend)된다. 이렇게 1)denature, 2)anneal, 3)extend가 한 cycle이 된다. 다음 cycle에서 original DNA와 새로 합성된 DNA가 분리되어 외가닥 DNA 주형이 된다. 따라서, n cycles 후에, 이론적으로 2n의 두가닥 DNA가 존재하게 된다.
유전공학 실험 - PCR과 Transformation PCR과 Transformation
실험 일시 :
1. Introduction
유전자를 cloning하여 vector에 주입하여 대장균에 주입하여 발현 정도를 관찰한다.
2. Materials
DNA template, primer, DW, DNA polymerase Buffer, dNTPs ..
DNA 증폭실험 DNA 증폭실험
1. 실험 목적
생명공학의 기초가 되는 분자 생물학의 기본 기술인 DNA를 다루는 기술을 알아본다.
미생물에서 Plasmid DNA를 분리하고, PCR을 이용하여 DNA를 증폭하고, 제한효소를 이용하여 DNA를 ..
PCR과 Ligation 제목: PCR과 Ligation
1. Introduction
1) ligation
· ligase는 PPi(이중 인산)를 제거하는 동시에 새 결합이 이루어지게 하는 효소
· ATP 또는 유사한 삼인산 화합물이 관여
· 카르복시화 반응의 경우에는 ..
[생리학과]캡사이신과 들기름 섭취한 쥐의 유영훈련 후 혈청 cpk와 ldh 활성도 변화 캡사이신과 들기름 섭취한 쥐의 유영훈련 후 혈청 CPK와 LDH 활성도 변화
The Change of blood CPK and LDH of Capsaicin and Perilla oil fed Rat after Swimming training
Ⅰ. 서 론
크레아틴인산효소(Creatine ..
형질 전환 동물을 만드는 방법 형질 전환 동물을 만드는 방법
< 형질 전환 동물에 대하여 >
1. 형질 전환 동물이란
- 형질 전환 동물이란 인위적으로 외래 유전자를 주입하여 본래의 유전형질이 변화되어진 동물을 말한다. 이러한 동물을 생산하..
Cytoplasmic Organelles Cytoplasmic Organelles
세포내기관은 세포내에서 세포의 metabolism상의 특정한 기능을 수행하기 위해 특수하게 조직된 작은 구조물들이다. 세포내기관은 다양한 enzyme을 포함한 protein, lipid, carbohydrate,..
[생리학] 근 수축과 활동 전위 그리고 칼슘채널에 관해서 Physiological studies on calcium channel and propagation
of action potential in skeletal muscles.
*골격근
골격근은 인체에서 체중의 약 40%를 차지한다. 골격근은 근의 기본 단위인 근섬유와 이를 결합하..
복제 ♣ 생명복제에 대한 나의 생각들을 정리해보면...
클론... 클론... 이란 단어를 언제 처음 접했던가
언제인지 기억은 없지만 ‘클론’하면 생각나는 영화가 있다. 영화의 제목은 기억이 나지 않지만 그 영화 속에는 ..
생물학실험보고서 - 멘델 유전 생물학실험보고서 - 멘델 유전
Ⅰ. 서론(Introduction)
실험목적은 옥수수를 이용하여 분리비를 알아보고 멘델의 유전법칙을 이해하는 것이다.
멘델의 유전법칙은 그레고어 멘델이 완두콩을 이용한 7년의 실험을..