Agarose gel electrophoresis& Gel elution
전기영동
용액에 전류를 통했을 때 용액 중의 하전 입자가 양극 또는 음극으로 이동하는 현상
주로 단백질 관련 물질 또는 유사한 성질을 가진 물질이 대상
이동의 원리
DNA자체가 전체적으로 (-)전하를 띄고 있는 것을 이용한 것
시간이 지날수록 size별로 움직인 거리 차이가 나는 원리 이용
전기영동법의 종류
이동 계면 전기영동 (moving-boundary electrophoresis)
띠 전기영동 (zone electrophoresis)
종이 전기영동
평판 겔 전기영동[polyacrylamide, agarose]
면역 전기영동
전분-겔 전기영동
원판 전기영동
SDS polyacrylamide 전기영동
Gel electrophoresis(젤 전기 영동법)
Gel matrix에 전류를 흘려보내 DNA, RNA, 단백질 등을 분리하는 방법
Gel에 따른 차이
: Agarose gel / DNA와 RNA band
: SDS-PAGE, 2D-gel 전기영동 / 단백질 band
평판 겔 전기영동
평판(slab)에서 동시에 여러 시료와 표준 물질을 분석 할 수 있는 기법.
Gel의 세공 크기를 조절하여 하전된 물질의 이동속도 결정.
대표적 Gel 물질: Agarose Polyacrylamide.
Polyacrylamide gel 전기영동
Polyacrylamide 농도:3~20% 가능
단백질은 SDS와 polyacrylamide 전기영동(SDS-PAGE)→ 분자량에 따른 분리
Agarose
다당류인 갈락틴이 선형으로 배열된 중합체
agar 또는 agar 성분의 해조류를 분리 정제
Agarose gel의 특성
저 농도의 gel에서도 분리가능